In sintesi: la dihexa non è un peptide idrosolubile. È un analogo dipeptidico lipofilo con estremità protette, di circa 505 Da, e le schede tecniche dei fornitori la indicano come insolubile in acqua ma facilmente solubile in DMSO — un lotto riporta 100 mg/mL in DMSO. Per questo il classico “aggiungi acqua BAC e agita con movimento rotatorio”, che vale in tutto il resto del sito, qui fallisce in silenzio. La prassi che funziona è un co-solvente in due fasi: prima il DMSO per ottenere una soluzione madre limpida, poi l’acqua batteriostatica per diluire. Il calcolatore per la dihexa gestisce concentrazioni e conversioni di unità; questa guida ripercorre il ragionamento perché i numeri abbiano senso.
Perché l’impostazione predefinita con acqua BAC non funziona con la dihexa
La maggior parte dei composti su questo sito sono peptidi corti e carichi. Portano catene laterali ionizzabili, formano volentieri legami a idrogeno con l’acqua e l’acqua batteriostatica li scioglie in pochi secondi. La dihexa (PNB-0408, N-hexanoic-Tyr-Ile-(6)-aminohexanoic amide, CAS 1401708-83-5, C27H44N4O5, MW 504.66) è tutt’altra bestia. È stata progettata deliberatamente per essere lipofila, in modo da sopravvivere al tratto gastrointestinale e attraversare la barriera ematoencefalica — il cappuccio esanoico su un’estremità e la coda amidica amminoesanoica sull’altra sono affini ai grassi per costruzione.
Quella scelta progettuale ha una conseguenza diretta al banco: le schede di caratterizzazione dei fornitori indicano la dihexa come insolubile in acqua e insolubile in etanolo, con il DMSO come solvente pratico. I dati Selleck per un lotto collocano la solubilità in DMSO a 100 mg/mL (circa 198 mM). Quindi, quando spingi 2 mL di acqua BAC in un flaconcino di dihexa da 5 mg, non succede granché. Ottieni una sospensione torbida, un dischetto che galleggia, oppure particelle che sembrano disciolte finché non si depositano un’ora dopo. Il flaconcino non ha nulla che non va. È semplicemente il solvente sbagliato per la molecola.
La scelta del solvente: prima il DMSO, poi l’acqua
Ci sono tre approcci che vedrai circolare tra i fornitori RUO, e non sono equivalenti.
DMSO puro. Sciogli l’intero flaconcino in DMSO e usalo così com’è. Chimicamente funziona — è esattamente il modo in cui si preparano le soluzioni madre per colture cellulari. Ti lascia però un volume molto piccolo e molto concentrato, scomodo da misurare su una siringa da insulina.
Sola acqua BAC. È l’impostazione predefinita del sito ed è quella che qui non si applica. Per la dihexa, saltala.
DMSO e poi acqua BAC (co-solvente). Sciogli in DMSO per ottenere una soluzione madre limpida, poi diluisci gradualmente con acqua batteriostatica. È quello che usano le pagine di riferimento dihexa 5mg e dihexa 10mg, ed è l’approccio descritto dalla maggior parte dei protocolli dei fornitori. Nota la direzione di marcia: le note di formulazione in vivo dei fornitori per la dihexa partono da una soluzione madre concentrata in DMSO e aggiungono la fase acquosa dopo, mai il contrario. Aggiungere DMSO in un flaconcino d’acqua ti dà un solvente diluito che non è più in grado di raccogliere la polvere.
Due note pratiche. Il DMSO è igroscopico — una bottiglia aperta da mesi ha già tirato acqua dall’aria, e una bottiglia umida scioglie di meno. E aggiungi l’acqua lentamente, a tappe, agitando con movimento rotatorio tra un’aggiunta e l’altra. Rovesciare 1.5 mL di acqua BAC in una soluzione madre concentrata di DMSO in un colpo solo è il modo classico di far riprecipitare subito il composto. Se succede, il meccanismo è lo stesso descritto in perché i peptidi gelificano o non si sciolgono.
Dihexa 5mg: i calcoli di concentrazione e di unità
Prendiamo la ricetta standard in due fasi per un flaconcino da 5 mg — quella su cui atterra la maggior parte delle ricerche di reconstitución de Dihexa.
Fase 1 — la soluzione madre in DMSO.
- 5 mg ÷ 0.5 mL DMSO = soluzione madre limpida da 10 mg/mL
Fase 2 — diluizione con acqua BAC.
- Aggiungi lentamente 1.5 mL di acqua BAC → volume totale 2 mL
- 5 mg ÷ 2 mL = 2.5 mg/mL
- Frazione di DMSO: 0.5 ÷ 2 = 25% di DMSO in volume
Fase 3 — conversione in unità di siringa. Su una siringa da insulina U-100, 1 mL = 100 unità, quindi:
mcg per unità = (mg/mL × 1000) ÷ 100
- 2.5 mg/mL = 2500 mcg/mL
- 2500 ÷ 100 = 25 mcg per unità
Da lì in poi ogni prelievo è una singola divisione:
- 100 mcg → 100 ÷ 25 = 4 unità
- 250 mcg → 250 ÷ 25 = 10 unità
- 500 mcg → 500 ÷ 25 = 20 unità
10 unità su un cilindro U-100 = 0.10 mL di una soluzione di dihexa a 2.5 mg/mL.
L’intero flaconcino da 2 mL corrisponde a 200 unità di cilindro. A 10 unità per prelievo fanno 20 prelievi — e la cosa conta, perché una miscela co-solvente ricostituita non è una faccenda da due anni. Le pagine di riferimento collocano la conservazione dopo ricostituzione a 2-8 °C per circa 2-4 settimane, quindi adatta la diluizione a quanto userai davvero in quella finestra.
Dihexa 10mg: stessa logica, scala doppia
Il flaconcino da 10 mg è il formato di ricerca più diffuso, e il trucco è che puoi farlo leggere in modo identico al flaconcino da 5 mg sulla siringa scalando entrambi i solventi:
- 10 mg ÷ 1 mL DMSO = soluzione madre da 10 mg/mL (come prima)
- Aggiungi 3 mL di acqua BAC → totale 4 mL
- 10 mg ÷ 4 mL = 2.5 mg/mL → 25 mcg per unità
- Frazione di DMSO: 1 ÷ 4 = 25%
Stessa concentrazione, stesse unità per prelievo, il doppio dei prelievi (400 unità di cilindro, 40 prelievi da 250 mcg). Se stavi usando il flaconcino da 5 mg e passi a quello da 10 mg, così l’aritmetica resta invariata — ed è la miglior ragione per sceglierlo.
Se invece vuoi una soluzione più densa, 1 mL di DMSO più 1 mL di acqua BAC danno 2 mL a 5 mg/mL, cioè 50 mcg per unità. Un prelievo da 250 mcg finisce allora su 5 unità. È tanta risoluzione da sacrificare su un cilindro graduato in unità intere, e ti lascia al 50% di DMSO in volume, una miscela ben più aggressiva. In qualunque lingua tu l’abbia cercato — Dihexa Rekonstitution, ricostituzione Dihexa — la risposta è di solito “più acqua, non meno”, fino al punto in cui il composto smette di restare in soluzione.
Scegliere un rapporto: frazione di DMSO contro risoluzione della siringa
Ecco il compromesso in una sola immagine. Ogni ricetta qui sotto parte dalla stessa soluzione madre in DMSO da 10 mg/mL e differisce solo per quanta acqua batteriostatica segue.
Tutte e quattro partono da una soluzione madre in DMSO a 10 mg/mL. Più acqua BAC significa risoluzione più fine sul cilindro e frazione di DMSO più bassa.
Leggilo come un problema di righello — la questione della dilution du Dihexa è in realtà una questione di misura, non di potenza. Aggiungere altra acqua non cambia quanto composto possiedi: cambia quanto finemente puoi misurarlo. La ricetta da 5 mL (1 mg/mL, 10 mcg per unità) colloca un prelievo da 250 mcg a 25 unità, splendidamente leggibile e con appena il 10% di DMSO. La ricetta densa da 2 mL mette lo stesso prelievo a 5 unità, dove sbagliare di mezza unità è un errore di dosaggio del 10%.
Il contrappeso è la solubilità. Non esiste una curva di solubilità pubblicata per la dihexa in miscele DMSO/acqua, quindi il punto in cui una data diluizione precipita è qualcosa che si scopre empiricamente, non qualcosa che si può consultare. È una lacuna onesta nei dati. Parti dal 25% di DMSO, che è il rapporto usato dalle pagine di riferimento e che tiene nella pratica, e spingi verso il 10% solo se la tua miscela resta visibilmente limpida a riposo.
Quando la miscela diventa torbida
La torbidità dopo l’aggiunta di acqua significa che il composto è uscito di nuovo dalla soluzione. Le cause abituali, in ordine di frequenza:
- Acqua aggiunta troppo in fretta. La concentrazione locale di acqua schizza nel punto di ingresso e lì il composto precipita. Aggiungila in 3-4 porzioni, agitando tra una e l’altra.
- DMSO umido o vecchio. La soluzione madre non si è mai chiarificata del tutto, quindi stavi diluendo una sospensione.
- Troppa acqua per il carico. Hai superato la capacità di trasporto della miscela. Abbassa la concentrazione obiettivo.
- Freddo. Una miscela appena tirata fuori da 2-8 °C può apparire opalescente e tornare limpida a temperatura ambiente. Lasciala scaldare prima di giudicarla.
Se è la soluzione madre in DMSO a non chiarificarsi, si tratta di un guasto diverso e vale la pena confrontarlo con la guida generale alla risoluzione dei problemi di ricostituzione — una soluzione madre che resta granulosa in DMSO puro di solito indica la polvere, non il metodo.
Cosa sostengono davvero le evidenze
Vale la pena essere chiari su questo punto, perché la reputazione della dihexa corre molto più avanti della sua base di evidenze. Il composto è nato nel gruppo di Joseph Harding alla Washington State University come analogo dell’angiotensina IV proposto per potenziare il fattore di crescita degli epatociti sul recettore c-Met. Tutti i dati primari sono preclinici — roditori e colture cellulari. Non esiste un dataset di farmacocinetica umana per la dihexa stessa, ed è esattamente per questo che nessuno può consegnarti un obiettivo di concentrazione validato.
La letteratura porta anche un problema reale di integrità. L’articolo di Kawas del 2012 e quello di Benoist del 2014 — i due studi che avevano stabilito il meccanismo HGF/c-Met — sono stati entrambi formalmente ritirati nel 2025, dopo un’indagine della Washington State University che ha riscontrato dati di immagine falsificati; lo studio di McCoy del 2013 sulla somministrazione orale porta un’espressione di preoccupazione del 2021 e non è stato ritirato. Separatamente, il fosgonimeton (ATH-1017), un profarmaco dello stesso programma, ha mancato l’endpoint primario nello studio di Fase 2/3 LIFT-AD nel settembre 2024.
Nulla di tutto ciò cambia la chimica della ricostituzione, che è una semplice questione di solubilità. Significa però che chiunque citi con sicurezza una “dose ottimale” per la dihexa sta estrapolando da valori in milligrammi per chilogrammo nei roditori, contenuti in articoli il cui status è contestato. I calcoli di questa guida ti dicono esattamente cosa c’è nella tua siringa; non possono dirti quale numero ci debba stare.
Domande Frequenti
Si può ricostituire la dihexa con la sola acqua batteriostatica?
No. La caratterizzazione dei fornitori indica la dihexa come insolubile in acqua, quindi la sola acqua BAC lascia una sospensione torbida o un dischetto non disciolto, per quanto a lungo tu agiti. L’approccio standard è prima il DMSO per ottenere una soluzione madre limpida, poi l’acqua batteriostatica aggiunta lentamente per diluirla fino a una concentrazione lavorabile.
Quanto DMSO si usa per un flaconcino di dihexa da 5mg?
0.5 mL di DMSO danno una soluzione madre limpida da 10 mg/mL, che è la concentrazione da cui parte la maggior parte dei protocolli di riferimento. Aggiungendo poi 1.5 mL di acqua batteriostatica si arriva a 2 mL totali, 2.5 mg/mL, e circa il 25% di DMSO in volume — il rapporto usato nella pagina di riferimento da 5mg.
A quante unità corrisponde una dose di dihexa su una siringa da insulina?
Dipende interamente dalla concentrazione. A 2.5 mg/mL hai 25 mcg per unità, quindi 250 mcg sono 10 unità e 500 mcg sono 20 unità. Cambia il volume d’acqua e ogni conteggio di unità cambia proporzionalmente. Il calcolatore per la dihexa esegue la conversione con precisione.
Perché la mia dihexa è diventata torbida dopo l’aggiunta di acqua?
Quasi sempre perché l’acqua è entrata troppo in fretta, il che fa schizzare la concentrazione locale di acqua e fa precipitare il composto. Aggiungi l’acqua batteriostatica in tre o quattro porzioni, agitando tra una e l’altra. DMSO vecchio e carico d’acqua e una diluizione eccessiva oltre la capacità di trasporto della miscela sono le altre due cause comuni.
Il flaconcino da 10mg richiede calcoli diversi da quello da 5mg?
La formula è identica. Scala entrambi i solventi insieme — 1 mL di DMSO più 3 mL di acqua BAC su un flaconcino da 10 mg — e arrivi agli stessi 2.5 mg/mL e agli stessi 25 mcg per unità della ricetta da 5 mg. Stesse letture, il doppio dei prelievi per flaconcino.
Esiste un limite di solubilità pubblicato per la dihexa in miscele di DMSO e acqua?
Non uno che si possa consultare. I fornitori pubblicano valori in DMSO puro (circa 100 mg/mL per un lotto riportato) e indicano l’acqua come non solvente, ma non esiste alcuna curva di solubilità per le miscele intermedie. Il punto di lavoro al 25% di DMSO deriva dalla pratica, non dalla letteratura, e vale la pena trattarlo come tale.
Riferimenti
- Selleck Chemicals. “Dihexa (PNB-0408) product data sheet” — CAS 1401708-83-5, C27H44N4O5, MW 504.66; solubility: DMSO 100 mg/mL (198.15 mM), water insoluble, ethanol insoluble.
- Cayman Chemical. “Dihexa product information insert,” item 14126 — solubility and storage characterisation.
- McCoy AT, Benoist CC, Wright JW, et al. “Evaluation of metabolically stabilized angiotensin IV analogs as procognitive/antidementia agents.” Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 2013;344(1):141-154. doi:10.1124/jpet.112.199497. (Carries a 2021 editorial Notice of Concern.)
- “Retraction notice to ‘The Procognitive and Synaptogenic Effects of Angiotensin IV-Derived Peptides Are Dependent on Activation of the Hepatocyte Growth Factor/c-Met System’ [J Pharmacol Exp Ther 351 (2014) 390-402].” Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 2025;392(4):103567. doi:10.1016/j.jpet.2025.103567.
- Retraction Watch. “Four papers by Athira CEO earn expressions of concern,” 24 September 2021.
- Athira Pharma. “Athira Pharma Announces Topline Results from Phase 2/3 LIFT-AD Clinical Trial of Fosgonimeton for Mild-to-Moderate Alzheimer’s Disease,” press release, 3 September 2024.
- Alzforum. “Fosgonimeton” therapeutics entry — trial history and outcomes for the dihexa-derived prodrug.
Questo articolo è unicamente un riferimento di ricerca ed educativo; la dihexa non è un medicinale approvato, questo non è un consiglio medico e non è destinata al consumo umano.