Resumo: Um frasco de 100 mcg de IGF-1 LR3 contém 0.1 mg — um décimo do frasco de 1 mg, muito mais comum — pelo que todos os números a jusante mudam por um fator de dez. Adicione 1 mL de diluente e obtém 100 mcg/mL, o que dá uns arrumados 1 mcg por unidade numa seringa U-100: uma aspiração de 20 mcg são 20 unidades. Os mesmos 20 mcg a partir de um frasco de 1 mg em 1 mL seriam 2 unidades. A calculadora de IGF-1 LR3 trata da conversão; este guia mostra a aritmética por trás dela, além da questão ácido acético contra água bacteriostática que persegue toda a família IGF.
Por que 0.1 mg altera todos os números
O IGF-1 LR3 é um análogo de 83 aminoácidos do fator de crescimento semelhante à insulina 1, com uma troca de arginina por glutamato na posição 3 e uma extensão N-terminal de 13 resíduos (Francis et al., J Mol Endocrinol, 1992). Essas duas alterações destroem a sua afinidade para as proteínas de ligação ao IGF, e é por isso que se comporta como se houvesse muito mais péptido livre em circulação do que o valor em miligramas sugere. Os fornecedores embalam-no em apresentações de 1 mg e de 100 mcg, e o frasco mais pequeno não é simplesmente «o barato» — é um problema de matemática diferente.
Quase todos os guias de reconstituição online estão escritos a pensar no frasco de 1 mg. Copie esses números para um frasco de 0.1 mg e entrega um décimo do que pretendia. Copie-os no sentido inverso e entrega dez vezes mais. Esse deslize da vírgula — 100 mcg lido como 0.1 mg lido como 1 mg — é a maior fonte isolada de erro nos péptidos abaixo do miligrama, e acontece no rótulo, não na seringa.
Para o enquadramento do composto — como o LR3 difere do DES(1-3) e do MGF, e por que os três não são intermutáveis — veja IGF-1 LR3 vs DES vs MGF. A página do frasco de 0.1mg tem a ficha técnica.
A fórmula de reconstituição, aplicada a 100 mcg
A fórmula nunca muda:
Concentração (mcg/mL) = conteúdo do frasco (mcg) ÷ volume de diluente (mL)
E numa seringa de insulina U-100, onde 1 mL = 100 unidades:
mcg por unidade = concentração (mcg/mL) ÷ 100
Aplique estas duas linhas aos volumes que as pessoas realmente usam num frasco de 100 mcg:
| Diluente adicionado | Concentração | mcg por unidade | Uma dose de 20 mcg |
|---|---|---|---|
| 0.5 mL | 200 mcg/mL | 2 mcg | 10 unidades |
| 1.0 mL | 100 mcg/mL | 1 mcg | 20 unidades |
| 1.5 mL | 66.7 mcg/mL | 0.67 mcg | 30 unidades |
| 2.0 mL | 50 mcg/mL | 0.5 mcg | 40 unidades |
A linha de 1 mL é a que vale a pena memorizar, porque anula por completo a conversão: a 100 mcg/mL, as unidades são iguais aos microgramas. Vinte unidades são 20 mcg. Cinquenta unidades são 50 mcg. Não sobra aritmética mental para errar, que é exatamente o que se quer num frasco tão pequeno. É essa propriedade que faz de 1 mL a sugestão predefinida na maioria dos textos sobre diluição de IGF-1 LR3 e a razão pela qual a calculadora a pré-seleciona.
Compare com o frasco de 1 mg: 1000 mcg em 1 mL dão 1000 mcg/mL, ou 10 mcg por unidade. O mesmo alvo de 20 mcg cai em 2 unidades — uma zona do corpo da seringa onde uma leitura errada de meia unidade é um erro de doseamento de 25%. O frasco pequeno não é menos preciso; é consideravelmente mais preciso, porque distribui a mesma dose por dez vezes mais corpo de seringa.
A 100 mcg/mL, 20 unidades numa seringa U-100 = 0.20 mL = 20 mcg. Unidades e microgramas correspondem um para um.
Se a conversão de unidades for a parte que o baralha em geral, mcg para unidades numa seringa de insulina trabalha o tema a partir dos primeiros princípios ao longo de várias concentrações.
Ácido acético, HCl diluído ou água bacteriostática
Esta é a questão que persegue todos os análogos do IGF, e vale a pena separar a química da conveniência.
O IGF-1 de grau de investigação e os seus análogos são tipicamente liofilizados a partir de sistemas de solventes ácidos — acetonitrilo com ácido trifluoroacético é comum — e as fichas técnicas dos fornecedores costumam indicar a reconstituição num veículo ácido: ácido clorídrico diluído a cerca de 10 mM, ou 0.1% a 1% de ácido acético, por vezes água estéril a uma concentração mínima declarada. A razão é a solubilidade. O IGF-1 tem um ponto isoelétrico na faixa ligeiramente ácida, e a proteína dissolve-se e mantém-se dissolvida com mais facilidade abaixo desse ponto do que a pH neutro.
A água bacteriostática é uma ferramenta diferente. É água estéril com cerca de 0.9% de álcool benzílico, e a sua função é antimicrobiana: permite que um frasco seja perfurado repetidamente ao longo de semanas sem que se instalem microrganismos. É quase neutra, pelo que não oferece qualquer ajuda à solubilidade, mas é de longe a escolha mais prática quando um frasco vai ser amostrado mais do que uma vez.
O compromisso a que a maioria dos protocolos laboratoriais chega é um processo em duas fases: dissolver o bolo num pequeno volume de veículo ácido para que entre totalmente em solução, e depois diluir até à concentração de trabalho no tampão de que a experiência precisar. Aplicado a um frasco de 100 mcg, isso pode significar 0.2 mL de ácido diluído para humedecer e dissolver, e depois 0.8 mL de água bacteriostática para chegar a 1 mL e 100 mcg/mL. A aritmética mantém-se inalterada — o volume total é o volume total — mas o péptido vê o ácido primeiro.
Duas notas práticas, em qualquer dos casos. Direcione o jato pela parede do frasco em vez de o fazer incidir sobre o bolo; os análogos do IGF são proteínas e o corte provocado por um jato dirigido é uma via de degradação real. E rode, nunca agite.
Doses por frasco, e onde se escondem as perdas
Esta é a parte que a maioria dos guias de dosagem de IGF-1 LR3 salta. Um frasco de 100 mcg com uma dose de trabalho de 20 mcg dá nominalmente cinco aspirações. Na prática não vai obter cinco, e a razão é o volume que nunca sai do sistema.
Com um enchimento de 1 mL, cinco aspirações de 0.20 mL consomem o mL inteiro sem sobrar nada para o resíduo que fica agarrado ao fundo do frasco, ao canhão da agulha e à rolha. Considere esse residual entre 30 e 50 µL. A 100 mcg/mL, isso são 3 a 5 mcg encalhados — 3 a 5% do frasco, ou aproximadamente um quarto de dose.
E aqui está a parte contraintuitiva: reconstituir em mais diluente recupera parte disso. O volume residual é praticamente fixado pelo material, pelo que a 2 mL os mesmos 40 µL de volume morto transportam apenas 2 mcg em vez de 4, porque a solução que retêm tem metade da força. Mais água significa que cada microlitro encalhado lhe custa menos péptido. A troca é um volume de aspiração duplicado — 40 unidades em vez de 20 para a mesma dose — o que costuma ser perfeitamente aceitável num corpo U-100.
O enchimento excedentário do fornecedor às vezes funciona no sentido contrário e devolve-lhe discretamente uma fração de dose. Doses por frasco, enchimento excedentário e espaço morto explica como estimar ambos sem adivinhar.
Há mais uma via de perda que importa especificamente nestas concentrações: a adsorção. As proteínas em baixa concentração ligam-se a superfícies de vidro e plástico, e 100 mcg/mL é baixo. Os protocolos laboratoriais acrescentam rotineiramente uma proteína transportadora — 0.1% de albumina sérica humana ou bovina — às soluções-mãe reconstituídas de IGF precisamente para ocupar essas superfícies. Um frasco reconstituído sem transportador e diluído ainda mais vai perder uma fração nada desprezável para as paredes de tudo o que tocar. É um bom argumento contra diluir demasiado um frasco abaixo do miligrama num volume grande só para obter números de unidades mais bonitos.
O que a evidência realmente sustenta
Vale a pena ser franco sobre a base de evidência, porque a matemática do doseamento é muito mais sólida do que a biologia a que está a ser aplicada.
A linhagem documentada do LR3 é pré-clínica e industrial. Francis e colegas caracterizaram o análogo em 1992, e Tomas et al., a trabalhar com ratos tratados com dexametasona, reportaram que era cerca de 2.5 vezes mais potente do que o IGF-1 a promover a retenção de azoto, apesar de se ligar ao recetor IGF do tipo 1 cerca de três vezes pior — a potência vem de escapar às proteínas de ligação, não de um melhor encaixe no recetor. Conlon et al. infundiram LR3 em cobaias durante sete dias e observaram um aumento do peso fracionário das suprarrenais, do intestino, dos rins e do baço, mas nenhuma estimulação do crescimento global, a par de uma supressão do IGF-I, do IGF-II e da IGFBP-3 endógenos.
Este último achado merece mais atenção do que costuma receber: a massa dos órgãos viscerais mexeu-se antes de qualquer outra coisa, e o próprio eixo IGF do animal ficou suprimido. Comercialmente, a maior utilização real do LR3 é como substituto da insulina em meios de cultura celular sem soro, onde é valorizado exatamente pela estabilidade que o torna interessante noutros contextos.
A frequentemente citada «semivida de 20 a 30 horas» circula amplamente no material dos fornecedores. Não conseguimos rastreá-la até um estudo de farmacocinética humana publicado, e deve ser lida como uma inferência plausível a partir da afinidade reduzida para as IGFBP, e não como um valor medido. Dados de dose-resposta em humanos especificamente para o LR3 não existem na literatura revista por pares. Qualquer dosagem de IGF-1 LR3 que veja citada — 20 mcg, 40 mcg, 50 mcg por dia — é convenção herdada da prática, não um número derivado de ensaios, e este artigo trata-a como um dado de entrada aritmético e não como uma recomendação.
Perguntas Frequentes
Quanta água bacteriostática devo adicionar a um frasco de 100mcg de IGF-1 LR3?
Um mililitro é a escolha mais útil, porque produz 100 mcg/mL — uma concentração em que as unidades de insulina e os microgramas correspondem um para um. Dois mililitros reduzem a força a metade, para 0.5 mcg por unidade, duplicando o tamanho da aspiração e a resolução. Ambas estão corretas; apenas a contagem de unidades muda.
Quantas unidades são 20mcg de IGF-1 LR3?
A 100 mcg/mL, ou seja, um frasco de 100 mcg em 1 mL, 20 mcg são exatamente 20 unidades numa seringa U-100, ou 0.20 mL. Reconstitua o mesmo frasco em 2 mL e 20 mcg passam a ser 40 unidades. Faça as suas próprias contas na calculadora de IGF-1 LR3.
O ácido acético é melhor do que a água bacteriostática para o IGF-1 LR3?
Os veículos ácidos dissolvem os análogos do IGF com mais facilidade, e é por isso que as fichas técnicas especificam HCl diluído ou ácido acético. A água bacteriostática é quase neutra mas contém um conservante, pelo que tolera perfurações repetidas. Não existe nenhuma comparação direta de estabilidade publicada para o LR3; muitos protocolos dissolvem num pouco de ácido e depois diluem com água bacteriostática.
Quantas doses tem um frasco de 100mcg de IGF-1 LR3?
Divida 100 pela sua dose em microgramas — cinco a 20 mcg, quatro a 25 mcg, duas e meia a 40 mcg. Subtraia cerca de 3 a 5% para a solução encalhada no frasco e no canhão da agulha, pelo que um frasco nominalmente de cinco doses rende realisticamente quatro aspirações completas mais uma parcial.
Por que os frascos de 1mg e de 100mcg de IGF-1 LR3 precisam de volumes de reconstituição diferentes?
Não precisam de volumes diferentes — produzem concentrações diferentes a partir do mesmo volume. Um frasco de 1 mg em 1 mL dá 1000 mcg/mL, dez vezes mais forte, pelo que as doses caem em 2 ou 3 unidades, onde uma pequena leitura errada é um erro grande. O frasco de 100 mcg distribui a mesma dose por dez vezes mais corpo de seringa.
Posso diluir um frasco de 100mcg num volume maior para um doseamento mais fino?
Pode, mas há um limite inferior. Abaixo de cerca de 50 mcg/mL, a adsorção do péptido a superfícies de vidro e plástico torna-se uma fração significativa daquilo que preparou, e é por isso que as soluções-mãe laboratoriais acrescentam 0.1% de albumina como transportador. Diluir para perseguir números de unidades mais arrumados pode custar mais do que a precisão que compra.
Referências
- Francis GL, Ross M, Ballard FJ, et al. “Novel recombinant fusion protein analogues of insulin-like growth factor (IGF)-I indicate the relative importance of IGF-binding protein and receptor binding for enhanced biological potency.” Journal of Molecular Endocrinology, 1992;8(3):213-223.
- Tomas FM, Knowles SE, Owens PC, Chandler CS, Francis GL, Read LC, Ballard FJ. “Insulin-like growth factor-I (IGF-I) and especially IGF-I variants are anabolic in dexamethasone-treated rats.” Biochemical Journal, 1992;282(Pt 1):91-97. doi:10.1042/bj2820091.
- Conlon MA, Tomas FM, Owens PC, Wallace JC, Howarth GS, Ballard FJ. “Long R3 insulin-like growth factor-I (IGF-I) infusion stimulates organ growth but reduces plasma IGF-I, IGF-II and IGF binding protein concentrations in the guinea pig.” Journal of Endocrinology, 1995;146(2):247-253. doi:10.1677/joe.0.1460247.
- Laajoki L, Le Breton E, Shooter GK, et al. “Secondary structure determination of 15N-labelled human Long-[Arg-3]-insulin-like growth factor 1 by multidimensional NMR spectroscopy.” FEBS Letters, 1997;420(1):97-102.
- Qkine. “Recombinant human IGF-1 LR3 protein (Qk041) — product datasheet.” Reconstitution, storage and stability guidance for lyophilised LR3.
- R&D Systems. “Recombinant Human LR3 IGF-I/IGF-1 GMP — datasheet.” Handling and reconstitution specifications.
Este artigo é apenas uma referência de investigação e educação; o IGF-1 LR3 não é um medicamento aprovado, isto não é aconselhamento médico e não se destina ao consumo humano.